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661W细胞培养,小鼠视网膜感光细胞培养攻略 - 丰晖生物

内容摘要:661W细胞培养,小鼠视网膜感光细胞培养攻略 - 丰晖生物...

661W,小鼠视网膜感光细胞。来源于由人光感受器间视黄醇结合蛋白启动子控制下表达SV40 T抗原的转基因小鼠。

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661W是一种视网膜神经节细胞(RGC)前体样细胞系,具有视网膜神经节和感光细胞的特性,可表达杆状光感受器和双极细胞标志物,以及视锥细胞感光器标志物,如蓝色和绿色视锥视蛋白、转导素和视锥抑制蛋白,但其水平远低于成熟的光感受器。

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有研究建立了一个新克隆661W-A11,可稳定地过表达神经视网膜亮氨酸拉链(NRL)转录因子,驱动细胞向视杆细胞分化,从而视杆细胞特异性基因表达显著增加,视锥细胞特异性基因无明显变化,这种新的细胞系适合作为研究遗传性视网膜变性(IRD)和体外药物筛选系统的细胞模型。

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综合来看,661W可用于探索与青光眼发病机制相关的细胞死亡诱导和细胞保护机制,目前广泛用于研究锥体变性、黄斑变性、视紫红质突变引起的视网膜色素变性(RP)、视网膜纤毛病。有研究发现2000年建系的RGC-5为661W的衍生物,虽然最初被认为是来自大鼠,但它们表达相同的视网膜神经节细胞和神经元细胞标志物。

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661W呈成纤维细胞样,贴壁生长。转染效率较低,细胞显示出神经元形状和突起形成,与光感受器的形态部分相似;可形成出与视锥体感光器外段结构相似的长初级纤毛,并将纤毛蛋白定位到轴突、膜和过渡区。该细胞经本库种属鉴定正确,且支原体检测呈阴性。

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661W细胞推荐使用DMEM培养基,添加10%血清。在37摄氏度,5%二氧化碳培养箱中培养。661W倍增时间约24h,建议每周2-3次更换新鲜培养基,按1:2至1:4进行传代。

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总结:

1. 成纤维细胞样,贴壁生长,常用在各种眼病相关研究上,如青光眼、锥体变性、黄斑变性、视网膜纤毛病等。

2. 推荐使用DMEM培养基,添加10%血清,在37度、5%二氧化碳培养箱中培养。

3. 661W细胞倍增时间约24h,推荐传代比例1:2至1:4,每周2-3次更换新鲜培养基。

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